Caracterización fenotípica de células madre mesenquimales humanas de médula ósea y tejido adiposo. Resultados preliminares / Phenotypic characterization of mesenchymal human stem cell from bone marrow and adipose tissue. preliminary results

Introducción:las células madre mesenquimales (CMM) poseen características fenotípicas y funcionales que les confieren un amplio potencial terapéutico por su posible uso en la terapia celular regenerativa, en el rechazo del trasplante alogénico y en enfermedades inflamatorias crónicas. Objetivo: evaluar la expresión de moléculas de membrana que permiten identificar la expresión de patrones moleculares característicos de CMM humanas mantenidas en cultivo. Métodos: se estudió la expresión fenotípica de células mononucleares procedentes de médula ósea obtenidas mediante aspiración medular, separadas por gradiente de Ficoll y cultivadas ex vivo entre los pases o subcultivos 3 y 16; y adipocitos cultivados procedentes de la extracción enzimática de tejido adiposo de donantes sanos. Se realizó doble marcaje para las moléculas CD34/CD45, CD34/CD90, CD34/CD117, y CD34/CD44. Resultados: en los resultados preliminares obtenidos se observó que las células cultivadas procedentes de médula ósea, entre los pases 4 y 8 de cultivo expresaron 45,13 por ciento de células CD34-/CD45- (doblemente negativas), lo que correspondió con el 25,24 por ciento de células CD34-/CD90+ y el 96,90 por ciento de CD34-/CD117-. En las células procedentes de cultivo de adipocitos se observó el 52,3 por ciento de CD34-/CD45- (doblemente negativas),12,31 por ciento de CD34-/CD90+,43,31 por ciento de CD34-/CD117- y 64,68 por ciento de CD34-/CD44+.Estos resultados sugieren que ambos cultivos se diferenciaron a CMM. Las CMM procedentes de adipocitos mostraron el 64,68 por ciento de células con expresión de la molécula de adhesión CD44 a la que se atribuyen propiedades funcionalescomo el asentamiento tisular. Conclusiones: estos resultados preliminares permiten corroborar que ambos métodos experimentales de cultivo son efectivos para la obtención de CMM con fines terapéuticos

Introduction:mesenchymal stem cells (MSCs) have phenotypic and functional characteristics whichgives them a broad therapeutic potential for possible use in regenerative cell therapy, allogeneic transplant rejection and chronic inflammatory diseases. Objective: to evaluate the expression of moleculemembranes expression to identify molecular patterns characteristic of human MSCs maintained in culture. Methods:the phenotypic expression of mononuclear cells from bone marrow wereobtained by bone marrow aspiration, separated by Ficoll and cultured ex vivo between passages or subcultures 3 and 16 and adipocytes cultured obtained from enzyme extraction of adipose tissue of healthy donor. Double staining was performed for molecules CD34/CD45, CD34/CD90, CD34/CD117 and CD34/CD44. Results:preliminary results showed that cultured mononuclear cells from bone marrow between passage 4 and 8 of culture expressed 45,13 percent CD34-/CD45- cells (double-negative), corresponding to 25,24 percent CD34-/CD90+ cells and 96,90 percent of CD34-/CD117-. Adipocytes from culture cells showed 52,3 percent CD34-/CD45- (double-negative), 12,31 percent cells CD34-/CD90+, 43,31 percent CD34-/CD117- (double-negative). Our results suggest that both cultures were differentiated to MSCs. Adipocytes from MSCs showed 64,68 percent of cells with expression of CD44 adhesion molecule conferring functional homing properties Conclusions:these preliminary results corroborate that the experimental methods used in cultivation are effective for obtaining MSCs with therapeutic purposes

La hemovigilancia de las reacciones adversas a la donación de sangre / Hemovigilance of adverse reactions to blood donation

Introducción: en la provincia de Matanzas, de enero del 2003 a diciembre de 2011, se desarrolló un programa de hemovigilancia para incrementar la seguridad de la cadena transfusional. Objetivo: analizar los efectos de este programa sobre las reacciones adversas en los donantes de sangre. Métodos: Se identificó el estado de la notificación de los eventos adversos de la donación en el año 2002, etapa previa al programa. Se mejoró el servicio de donaciones con la revisión de los procederes y las buenas prácticas; a la metodología para la selección del donante se incorporaron los datos geográficos epidemiológicos de cada territorio. A partir de 2003, se notificaron las reacciones adversas de la donación mediante un formulario diseñado para ese fin, se analizaron sus causas, se tomaron las medidas preventivas y correctivas pertinentes. Se efectuaron acciones para prevenir estas y mejorar la calidad de la colecta como capacitación y consejería a los donantes. Se organizó un sistema de alerta rápida para detectar y minimizar los riesgos relacionados con la donación y la calidad de la colecta. Resultados: se disminuyó la tasa de reacciones del donante de 10,1 por mil donaciones en 2002 a 1,4 por mil donaciones en 2011. Se eliminaron las reacciones graves y se minimizaron las moderadas. La reacción más frecuente fue la vasovagal leve. Conclusiones: la hemovigilancia es una herramienta eficaz para incrementar la seguridad de los donantes y mejorar la calidad de la colecta de sangre y puede implementarse con escasos recursos

Introduction: from January 2003 to December 2011 a program of hemovigilance was developed to increase the safety of transfusion in the province of Matanzas. Objective: to analyze the effects of this program on the adverse reactions of blood donors. Methods: adverse reactions to blood donation were identified in 2002 prior to the introduction of the program. The donation service was improved with the revision of procedures and standard practice; epidemiological and geographic data was included in the donor's selection process. From 2003 on, the adverse reactions to donations were notified using a form specially designed; causes were analyzed and prevention and corrective actions were taken. Other proceedings were applied to prevent negative reactions at donation and to improve the quality of blood collection, such as training and advice to donors. A quick alert system was set up to detect and to correct the risks related to donation and the quality of the collection. Results: there was a decrease on the donor's reaction rate from 10, 1 out of 1 000 donations in 2002 to 1,4 out of 1000 in 2011. Severe adverse reactions were eliminated and moderate reactions were minimized. The most frequent was the vasovagal reaction. Conclusions: hemovigilance is an effective tool to increase donors' safety and to improve the quality of blood collection and it can be implemented with scarce resources

Caracterización fenotípica de las células madre de médula ósea utilizadas en la terapia celular regenerativa / Phenotypic characterization of the bone marrow stem cells used in regenerative cellular therapy

La Medicina Regenerativa es una novedosa terapéutica de amplio potencial en diferentes enfermedades para la cual se utilizan células madre procedentes de la médula ósea (MO), cuya caracterización fenotípica es limitada. En nuestro trabajo se estudió la expresión de diferentes marcadores de la membrana celular en células mononucleares (CMN) de la MO de 14 pacientes a quienes se les realizó terapia celular autóloga, obtenidas por punción medular y movilización a la sangre periférica, con el objetivo de caracterizar los diferentes tipos de células presentes en esta población celular heterogénea e identificar las moléculas de adhesión implicadas en su adhesión. Se observó mayor presencia de células madre adherentes del estroma medular en las CMN obtenidas directamente de la MO; una mayor población de células CD90+ en las CMN procedentes de sangre periférica CD34-/CD45- con una elevada expresión de las moléculas CD44 y CD62L, lo que sugiere mayor presencia de células madre mesenquimales (CMM) en las células movilizadas del estroma medular. Los valores más elevados de células CD34+ en las células madre procedentes de sangre periférica con baja expresión de las moléculas CD117- y DR- sugiere la presencia de células madre hematopoyéticas, hemangioblastos y células progenitoras endoteliales movilizadas a la circulación periférica. Se demostró que tanto las CMN procedentes de MO como de sangre periférica, muestran una elevada expresión de células madre con expresión de la molécula de adhesión CD44 (marcador de CMM), probablemente implicadas en su migración, asentamiento y diferenciación

Regenerative medicine is a novel therapeutic method with broad potential for the treatment of various illnesses, based on the use of bone marrow (BM) stem cells, whose phenotypic characterization is limited. The paper deals with the expression of different cell membrane markers in mononuclear BM cells from 14 patients who underwent autologous cell therapy, obtained by medullary puncture and mobilization to peripheral blood, with the purpose of characterizing the different types of cells present in that heterogeneous cellular population and identifying the adhesion molecules involved in their adhesion. A greater presence was observed of adherent stem cells from the marrow stroma in mononuclear cells obtained directly from the BM; a larger population of CD90+ cells in mononuclear cells from CD34-/CD45- peripheral blood with a high expression of molecules CD44 and CD62L, which suggests a greater presence of mesenchymal stem cells (MSC) in mobilized cells from the marrow stroma. The higher levels of CD34+ cells in peripheral blood stem cells with a low expression of molecules CD117- and DR- suggests the presence of hematopoietic stem cells, hemangioblasts and progenitor endothelial cells mobilized to peripheral circulation. It was found that mononuclear cells from both the BM and peripheral blood show a high presence of stem cells with expression of adhesion molecule CD44 (MMC marker), probably involved in their migration, settling and differentiation

Desarrollo de la Hematología en Cuba: perspectivas y posibilidades de colaboración regional e internacional / Development of the hematology in Cuba: perspectives and possibilities of regional and international cooperation

Desde la fundación en 1966, del Instituto de Hematología e Inmunología (IHI), centro rector de la especialidad en Cuba, se ha trabajado intensamente en la búsqueda y aplicación de los protocolos de tratamiento más actuales y la introducción de innovaciones tecnológicas para el diagnóstico y tratamiento de pacientes con hemopatías, lo que ha permitido alcanzar niveles de curación similares a los de países desarrollados, en enfermedades como la leucemia linfoide aguda en niños, y se ha logrado la aplicación de estos protocolos en todos los servicios de hematología del país. Con la atención integral a los pacientes hemofílicos y con anemia drepanocítica, se ha elevado su expectativa de vida con una calidad de vida superior. Se han formado especialistas para todo el Sistema Nacional de Salud (SNS), así como enfermeras, técnicos y otros profesionales vinculados con la especialidad, que también realizan colaboración en diversos países. El nivel alcanzado ha permitido la contribución, de manera relevante, en el desarrollo del trasplante de médula ósea, y en el campo de la Medicina Regenerativa se ha logrado introducir el autotrasplante con células madre en varias enfermedades, en lo que ya participan diferentes centros del país. La seguridad de la sangre y la garantía de su calidad ha sido objetivo determinante en la Medicina Transfusional, que es vital para todas las ramas de las ciencias médicas. Esta labor y los resultados exitosos obtenidos, han posibilitado la integración de una red nacional de servicios de hematología que contribuye decisivamente al fortalecimiento del SNS y es ejemplo destacado de los logros de la medicina revolucionaria. Esta experiencia abre posibilidades para incrementar la colaboración internacional y fundamentalmente, para la integración con otros países, principalmente de nuestra región, que contribuya a optimizar los niveles de salud y mejorar la calidad de vida de nuestros pueblos

From the foundation in 1966 of the Institute of Hematology and Immunology (IHI) as guiding center of specialty in Cuba, the main objective has been the search and application of more recent treatment protocols and the introduction of technological innovations for diagnosis and treatment of patients presenting with hemopathies allowing us to achieve cure levels similar to those of developed countries in diseases like the acute lymphoid leukemia in children and it has been possible to achieve the application of these protocols in all the Hematology services in our country. With the integral care of hemophilic patients and with the drepanocythemia its life expectancy has increased with a high quality of life. For all the National Health System (NHS) specialists have been trained, as well as nurses, technicians and other professionals linked to specialty who give contribution in different countries. The level achieved allows us the contribution in a relevant way in the development of bone marrow transplantation and also in the field of Regenerative Medicine it was possible the introduction the autotransplantation with stem cells in some diseases with the participation of different centers of the country. The blood safe and the guarantee of its quality has been a determinant objective in the Transfusion Medicine essential of all the branches of the medical sciences. This task and the successful results achieved, allowed the integration of a National Framework of Hematology services contributing en a decisive way to strengthening of NHS and it is a distinguished example of the achievements of revolutionary medicine. This experience opens the possibilities to increase the international cooperation and mainly of our region contributing to optimize the health levels and to improve the quality of life of our populations

Investigaciones relevantes en el Instituto de Hematología e Inmunología en la década 2000-2009 / Relevant researches in the Institute of Hematology and Immunology during 2000-2009

A partir de la creación en 1966 del Instituto de Hematología e Inmunología (IHI), se abrieron nuevas perspectivas para el desarrollo e integración de estas especialidades en Cuba. Con el decursar de los años, estas posibilidades se han ido haciendo realidad y se han aportado diversos resultados que han permitido incrementar en nuestro país, los conocimientos sobre diferentes aspectos vinculados con estas especialidades. En el IHI se hace una selección periódica de los temas priorizados de investigación y con estos se confeccionan los planes de investigación a corto, mediano y largo plazo. Sobre esta base, en la última década se han establecido los objetivos priorizados y se han seleccionado los resultados científico-técnicos más relevantes. El presente artículo muestra la relación de estos resultados y describe la contribución de cada uno de ellos al desarrollo científico-técnico alcanzado por la institución durante la década 2000-2009

From the creation in 1996 of the Institute of Hematology and Immunology (IHI) new perspectives were opened for the development and integration of theses specialties in Cuba. In the course of time, these possibilities became reality yielding different features linked to these specialties. In the IHI a periodic selection is made of the priority subjects of research and with its use the short, medium and long-term research plans are designed. On this base during the past decade have been established the priority objectives and the more relevant scientific-technical results have been selected describing the contribution of each to scientific-technical development for our institution during 2000-2009

Experiencia en el desarrollo y la aplicación de la inmunología en los últimos 10 años / Experience in development and application of Immunology in the past 10 years

Se presentan los resultados alcanzados en las investigaciones inmunológicas realizadas en el Instituto de Hematología e Inmunología en los últimos 10 años. Se describen las investigaciones básicas fundamentales relacionadas con el estudio de las moléculas de adhesión en condiciones fisiológicas y patológicas, como el síndrome coronario agudo y la anemia drepanocítica (AD). Se refieren los trabajos relacionados con el diagnóstico inmunológico de los síndromes linfoproliferativos que aportaron datos a la inmunoepidemiología de las hemopatías malignas, especialmente en sus características fenotípicas; los aspectos de mayor interés en el estudio de la AD, como la disminución de los niveles de los anticuerpos naturales anti-banda 3 en los enfermos con crisis vasooclusivas y su posible participación en el fenómeno de vasooclusión, así como la importancia de las moléculas de adhesión en su etiopatogenia. Se describen los resultados del estudio de detección de anticuerpos contra la proteína de fusión PML/RARa en la leucemia promielocítica y su posible utilidad como marcador de diferenciación celular a partir de la presencia o ausencia de la proteína de fusión en la célula leucémica. Los resultados obtenidos han contribuido notablemente al desarrollo de la Inmunología en Cuba y servirán de pauta para el desarrollo futuro de la especialidad

Authors showed the results achieved in immunological researches in the Institute of Hematology and Immunology during past 10 years. The main basic researches are described in relation to the study of adhesion molecules under physiological and pathological conditions like in the case of the acute coronary syndrome and the drepanocythemia (D). The papers related to the immunological diagnosis of lymphoproliferative syndromes are refered which provide data to the immunoepidemiology of malignant hemopathies, specially in its phenotypic characteristics; the features of more interest in the study of the D, e.g. the decrease of levels of anti-band 3 natural antibodies in patients with vaso-occlusive crisis and its possible participation in the phenomenon of vaso-occlusion, as well as the significance of adhesion molecules in its etiopathogenesis. The results from the study of antibodies detection to PML/RARa fusion protein in the promyelocyte leukemia and its possible usefulness as marker of cellular differentiation from the presence or absence of fusion protein in the leukemic cell are described. The results achieved have contributing very much to development of Immunology in Cuba and will become standard for the future development of the specialty

Desarrollo de la Medicina Transfusional en el Instituto de Hematología e Inmunología en el período 1996-2010 / Development of the transfusion medicine in the Institute of Hematology and Immunology during 1996-2010

El desarrollo de la Medicina Transfusional en el Instituto de Hematología e Inmunología en los últimos 15 años, se ha caracterizado por el logro de resultados relevantes en aspectos metodológicos, técnico-investigativos y de desarrollo de los recursos humanos, como son: la actualización y distribución de procederes para bancos de sangre, servicios de transfusiones y de guías clínicas para el uso de los componentes de la sangre en todo el país; la implementación del sistema de gestión de la calidad y automatización en los bancos de sangre; la introducción de técnicas moleculares para el pesquisaje viral de donantes de sangre; la introducción de anticuerpos monoclonales hemoclasificadores de producción nacional; el desarrollo de investigaciones multicéntricas sobre aspectos socioculturales relacionados con la donación de sangre y el pesquisaje de agentes infecciosos en pacientes politransfundidos; la obtención y procesamiento de células madre hematopoyéticas de sangre periférica para trasplante y medicina regenerativa, así como el desarrollo de la hemovigilancia. Las proyecciones de trabajo deberán estar encaminadas a la creación de un banco de células progenitoras de cordón umbilical para uso clínico, la obtención y producción nacional de concentrados de factores de la coagulación para uso terapéutico y el desarrollo de un programa nacional de hemovigilancia

The development of the Transfusion Medicine in the Institute of Hematology and Immunology in past 15 years, has been characterized by the achievement of relevant results in the methodological, technical-research and of the development or human resources features including: the updating and distribution of procedures for the blood banks; transfusion services and of clinical guidances for the use of blood components in all the country; the implementation of the quality management system and the blood banks automation, the introduction of molecular techniques for the viral screening of blood donors; the introduction of hemoclassifying monoclonal antibodies of national production, the development of multicenter researches on the sociocultural features related to blood donation and the screening of infectious agents in poly-transfused patients; the obtaining and processing of hematopoietic stem cells of peripheral blood for transplantation and regenerative medicine, as well as the development of the hemo-surveillance. The work projections must to be aimed to creation of a bank of progenitor cells from the umbilical cord to clinical use, the achievement and national production of coagulation factor concentrates to therapeutic use, and the development of a national program of hemo-surveillance

Características fenotípicas y funcionales de las células madre mesenquimales y endoteliales / Phenotypical and functional features of the mesenchymal and endothelial stem cells

Se presentan los conceptos actuales sobre las células madre provenientes de la médula ósea y la importancia de las células estromales en la Medicina Regenerativa. Se describen, en particular, las características fenotípicas de las células madre mesenquimales y endoteliales, así como las de diferentes tipos celulares relacionados, sus propiedades funcionales y la importancia dada al uso de estas células en diversas aplicaciones terapéuticas. Se refieren los resultados de su estudio en distintos estados patológicos, las variaciones por la acción de drogas y de los factores de crecimiento, y su potencialidad futura en el diagnóstico y tratamiento de diferentes enfermedades

The current concepts on the stem cells from bone marrow and the significance of the stromal cells in Regenerative Medicine are showed. In particular, the phenotypical features of mesenchymal and endothelial stem cells are described, as well as the different related types of cells, its functional and the significance properties given to use of these cells in different therapeutic applications. The results of study in different pathologic states, the variations due to drugs action and of the growth factors are recounted as well as its future potential in diagnosis and treatment of different diseases

Eficacia diagnóstica de sistemas de inmunoensayos para el virus de la hepatitis C en muestras de pacientes multitransfundidos / Diagnostic effectiveness of immunoassays systems for hepatitis C virus in samples from multi-transfusion patients

La transmisión del virus de la hepatitis C (VHC) a través de la sangre constituye un problema de salud en Cuba y el mundo. Varios tipos de inmunoensayos diagnosticadores se han desarrollado para la certificación de sangre y generalmente cuentan con una elevada sensibilidad y especificidad diagnóstica en donantes sanos. Sin embargo, su comportamiento en muestras de pacientes multitransfundidos podría ser menos eficaz. Para evaluar la eficacia diagnóstica del inmunoensayo cubano UMELISA HCV 3er Gen. (TecnoSUMA SA, La Habana, Cuba) en muestras de pacientes multitransfundidos, se procesaron en paralelo 335 sueros de pacientes por los sistemas UBI® HCV EIA 4.0 (United Biomedical, EE.UU.) y UMELISA HCV 3er Gen., y las muestras con resultados incongruentes se confirmaron por el sistema de PCR COBAS AmpliScreen HCV Test, v2. (Roche, EE.UU.). Cuando se comparó el sistema UMELISA HCV 3er Gen. con el UBI® HCV EIA 4.0 se obtuvo una Sd de 95,8 % IC (95 %): 92,599,15 y Ed de 100 % IC (95 %): 99,7-100, con IY: 0,96 (0,93-0,99). k: 0,9582 ID (95 %): 0,9276-0,9888, p=0,000. Ambos sistemas de inmunoensayos fueron satisfactorios para el inmunodiagnóstico de pacientes multitransfundidos.

Hepatitis C virus (CHV) blood-transmission is a health problem in Cuba and in the world. Some types of diagnostic immunoassays have been developed for the blood certification and in general have a high diagnostic sensitivity and specificity in healthy donors. However, its behavior in samples from multi-transfusion patients could by less effective. To assess the diagnostic effectiveness of the UMELISA HCV third generation Cuban immunoassay (TecnoSUMA, S.A. La Habana), Cuba) in samples from multi-transfusion patients, in parallel, 335 sera from patients were processed by UBI® HCV EIA 4.0 (United Biomedical, EE.UU) and UMELISA HCV third generation, and the samples with incongruous results were verified by PCR COBAS AmpliScreen HCV Test, v2 system (Roche, EE.UU.) Comparing the UMELISA HCV third generation system with the UBI® HCV EIA 4.0 it was achieved a Sd of 95,8% CI(95%): 92,5-99,15 and a Ed of 100% CI (95%): 99,7-100, with IY: 0,96 (0,93-0,99) with k: 0,0582 ID (95%): 0,9276-0,9888, p = 0,000. Both immunoassay systems were satisfactory for immunodiagnosis of multi-transfusion patients.

Moléculas de adhesión. Importancia en el síndrome coronario agudo / Significance of adhesion molecules in acute coronary syndrome

Se presenta una revisión de los conceptos actuales de la ateroesclerosis como fenómeno inflamatorio crónico del endotelio vascular y de la importancia de la participación de las moléculas de adhesión endoteliales en las formas clínicas principales del síndrome coronario agudo: la angina inestable y el infarto agudo del miocardio. Se describen los resultados obtenidos por diferentes autores en el estudio de las moléculas de adhesión en este síndrome, su importancia en el diagnóstico asociado con los parámetros séricos convencionales y su potencial terapéutico.

Present paper is a review of current concepts of atherosclerosis as a chronic inflammatory phenomenon of vascular endothelium and of significance involvement of endothelial adhesion cells in the main clinical ways of acute coronary syndrome: unstable angina and myocardial acute infarction. Different authors describe the results achieved in adhesion molecules study in this syndrome, its significance in diagnosis associated with conventional serum parameters and its therapeutical potential.

Expresión de las moléculas de adhesión en la anemia drepanocítica / Expression of adhesion molecules in cases of drepanocytemia

En enfermos con anemia drepanocítica (AD) en estado basal y con crisis vasooclusivas dolorosas (CVOD), se estudió la expresión, en células mononucleares (CMN) y neutrófilos, de las moléculas de adhesión LFA-1, VLA-4, L-selectina e ICAM-1; en sangre periférica (SP), las moléculas VCAM-1 y CD34 y en fracciones de hematíes con diferente densidad, las moléculas VLA-4 y Lutheran, con anticuerpos monoclonales específicos mediante inmunofluorescencia indirecta por citometría de flujo. En ambos grupos de enfermos se observó una disminución significativa en la expresión en las CMN de las moléculas LFA-1 y VLA-4, y de LFA-1 en los neutrófilos de los pacientes en estado basal; disminución de la expresión de la molécula L-selectina en CMN y neutrófilos de pacientes en estado basal. El aumento de las moléculas ICAM-1 (CD54), CD34 y VCAM-1(CD106) en las CMN y sangre periférica de pacientes basales, demuestra la presencia de un estado de activación leucocitario y endotelial permanente determinado por la continua inflamación subclínica. El incremento significativo de ICAM-1 en neutrófilos y CD34 y VCAM-1 en sangre periférica en ambos grupos de pacientes, con mayor aumento de VCAM-1 en los pacientes en crisis, refleja la activación de monocitos, linfocitos, neutrófilos y de células endoteliales durante las CVOD, y la liberación de estas últimas a la periferia. Se observó una mayor expresión de las moléculas LFA-1, L-selectina e ICAM-1 en los neutrófilos de los enfermos con CVOD e incremento significativo de la molécula CD18 en CMN de los pacientes con CVOD, que puede explicarse por la activación de los monocitos en el fenómeno vasooclusivo.

In patients with drepanocytemia (DP) in basal state and with crises of painful vaso-occlusive (PVOC) authors studied the expression in mononuclear cells (MNC) and neutrophils, of LFA-1, VLA-4, L-selectine and ICAM-1; in peripheral blood (PB), VCAM-1 and CD34 molecules, and in red blood cells with different density, VLA-4 and Lutheran molecules, with specific monoclonal antibodies by indirect immunofluorescence by flux cytometry. In both groups there was a significant decrease in expression of LFA-1 and VLA-4 molecules MNC and of LFA-1 in neutrophils of patients basal state; decrease in L-selectine molecule expression in MNC and in patients in basal state. Increase of IACM-1 (CD54), CD34 and VCAM-1 (CD106) in MNC and in peripheral blood of basal patients shows the presence of a permanent leukocyte activation state determined by the continuous subclinical inflammation. The significant increase of ICAM-1 in neutrophils and CD34 and VCAM-1 in peripheral blood in both groups of patients with a higher increase of VCAM-1 in patients in crises, shows the monocyte, lymphocyte , neutrophils, and of endothelial cells during the PVOC and the release of these latter to periphery. We note a higher expression of LFA-1, L-selectine and ICAM-1 molecules in neutrophils of patients with PVOC and a significant increase of CD18 molecule in MNC of patients with PVOC that may be explained by monocyte activation in vaso-occlusive phenomenon.

Uso del factor VII activado recombinante en pacientes no hemofílicos en Cuba / Use of the recombinant activated factor VII in non-hemophilic patients in Cuba

El factor VII activado recombinante (rFVIIa, NovoSeven®) ha sido utilizado en el tratamiento de los sangramientos en los pacientes hemofílicos con inhibidores. También ha sido usado para el tratamiento de los sangramientos no controlados asociados con trauma o cirugía. Se describe el tratamiento con rFVIIa en 7 pacientes no hemofílicos con un amplio rango de eventos hemorrágicos: 3 a quienes se les realizó trasplante hepático y presentaron sangramiento postrasplante sin respuesta al tratamiento convencional; 1 con aplasia medular severa y hemorragia retiniana; 1 con enfermedad de Rendú-Osler-Weber, quien tuvo un sangramiento gastrointestinal severo; y 1 paciente con manifestaciones hemorrágicas cutáneas y pulmonares debido a una enfermedad viral. La dosis de rFVIIa utilizada fue entre 90_100 µg/kg de peso, tanto para el tratamiento profiláctico como terapéutico. El rFVII activado alcanzó una hemostasia efectiva en todos los casos. Consideramos que el FVII activado puede ser aplicado cuando la combinación de los hemoderivados y los avances quirúrgicos han fallado en el control de los sangramientos que ponen en peligro la vida.

The recombinant activated factor VII (rFVIIa, NovoSeven®) has been used in the treatment of bleedings in hemophilic patients with inhibitors. It has also been used for treating uncontrolled bleedings associated with trauma or surgery. The treatment with rFVIIa in 7 non-hemophilic patients with a wide range of hemorrhagic events is described: 3 that underwent liver transplant and presented posttransplant without response to the conventional treatment; 1 with severe medullary aplasia and retinal hemorrhage; 1 with Rendú-Osler-Weber's disease that had severe gastrointestinal bleeding; and 1 patient with cutaneous and pulmonary hemorrhagic manifestations due to a viral disease. The dose of rFVIIa used was between 90 and 100 µg/kg of weight, both for the prophylactic and therapeutic treatment. The activated rFVII reached an effective hemostasis in all cases. We consider that the activated FVII may be applied when the combination of hemoderivatives and the surgical advances have failed in the control of bleedings endangering life.

Efecto in vitro de la espirulina sobre los linfocitos humanos de donantes sanos y pacientes con inmunodeficiencia celular / In vitro effect of Spirulina on the human lymphocytes of healthy donors and patients with cellular immunodeficiency

La espirulina (Spirulina sp) es un alga cianofícea empleada como suplemento alimentario y por sus propiedades medicinales. Se realizó este trabajo para evaluar el efecto in vitro de la esprirulina (Spirel, Génix, Ciudad de La Habana, Cuba) en 30 pacientes con diagnóstico de inmunodeficiencia celular y en 20 donantes sanos del Instituto de Hematología e Inmunología mediante las pruebas de transformación linfoblástica con criterio de timidina tritiada; en la expresión de los antígenos de activación HLA-DR y CD25 por el ultramicrométodo inmunocitoquímico y la formación de roseta activa. En la transformación linfoblástica con criterio de timidina tritiada no se hallaron diferencias estadísticamente significativas entre las condiciones experimentales sin y con espirulina, tanto en los pacientes con inmunodeficiencias celulares como en los donantes sanos, mientras que se hallaron diferencias estadísticamente significativas (p£0,001) al aplicar la prueba t de Student para muestras pareadas entre las condiciones experimentales sin y con espirulina, tanto en la expresión de los antígenos de activación como en la formación de roseta activa en ambos grupos analizados. Se concluye que la espirulina de producción cubana influye positivamente en el proceso de activación de los linfocitos humanos.

Spirulina (Spirulina spp) is a Cyanophyceae alga used as a dietary supplement and for its medicinal properties. This paper was aimed at evaluating the in vitro effect of spirulina (Spirel, Génix, Havana City, Cuba) on 30 patients with diagnosis of cellular immunodeficiency and on 20 healthy donors from the Institute of Hematology and Immunology by the lymphoblastic transformation tests with tritiated thymidine, expression of HLA-DR and CD25 activation antigens by the immunocytochemical ultramicromethod, and the formation of active rosette. In the lymphoblastic transformation with criterion of tritiated thymidine, no statistically significant differences were found under the experimental conditions with and without spirulina, both in patients with cellular immunodeficiencies and in sound donors. Statistically marked differences (p 0,001) were detected on applying the Student's t test for matched samples between the experimental conditions with and without spirulina in the expression of the activation antigens and in the rosette formation in the analyzed groups. It was concluded that spirulina produced in Cuba exerted a positive influence on the activation process of human lymphocytes.

Reacciones transfusionales en el Hospital Docente Provincial “Comandante Faustino Pérez” de la provincia de Matanzas / Transfusion reactions at “Comandante Faustino Pèrez” Provincial University Hospital in the province of Matanzas

A partir del año 2003, en el Hospital Docente Provincial “Comandante Faustino Pérez” se inició el control y análisis de los efectos adversos de la transfusión de sangre, mediante el reporte y estudio de todas las reacciones transfusionales, para conocer su frecuencia, tipo y gravedad, así como su relación con el componente utilizado, los días de extraído y el sexo del receptor. Se reportaron los errores detectados y subsanados antes del proceder. Este estudio se realizó bajo la asesoría y control del Banco de Sangre Provincial “Minerva Duarte”, como parte de la vigilancia sobre los productos sanguíneos y la cadena transfusional, con el objetivo de disminuir los efectos adversos e incrementar la seguridad transfusional. Los datos obtenidos demuestran disminución del número de reacciones adversas, de 52 en el 2002 a 14 en el 2005. Las más frecuentes fueron la febril no hemolítica y las alérgicas; la más grave resultó la contaminación bacteriana. Los errores más frecuentes subsanados antes de la transfusión fueron por equivocación del grupo en la bolsa a transfundir. El componente que más reacciones originó fue el concentrado de hematíes y el sexo femenino fue el que más reacciones presentó. El estudio permitió la adopción de medidas correctivas y preventivas para disminuir las reacciones e incrementar la seguridad transfusional en el centro hospitalario.

From 2003 on, it was started the control and analysis of the adverse effects of blood transfusion at “Comandante Faustino Pérez” Provincial University Hospital by the report and study of all the transfusion reactions in order to know their frequency, type and severity, as well as their relation to the component used, the date of the extraction, and the sex of the recipient. The errors detected and corrected before the procedure were reported. This study was conducted under the counselling and control of “Minerva Duarte” Provincial Blood Bank as part of the vigilance of the blood products and the transfusion chain aimed at reducing the adverse effects and at increasing transfusion safety. The data obtained showed a decrease of the number of adverse reactions from 52, in 2002, to 14, in 2005. The most common reactions were the non-hemolytic febrile reactions and the allergic reactions, whereas the most serious was bacterial contamination. The most frequent amended mistakes before transfusion were those made by the group with the transfusion bag. The packed cells proved to be the component that originated the greatest amount of reactions. Females had more reactions. The study allowed to take corrective and preventive measures to lower the reactions and improve the transfusion safety in the hospital.

Desarrollo de un sistema de hemovigilancia en el Hospital Iluminado Rodríguez, del Municipio Jagüey Grande, Matanzas / Development of a system of hemosurveillance in Iluminado Rodríguez Hospital of Jagüey Grande municipality, Matanzas

En la etapa comprendida entre enero de 2003 y diciembre de 2005, se desarrolló un sistema de hemovigilancia en nuestra provincia, con el objetivo de incrementar la seguridad transfusional mediante la reducción de los efectos adversos de la transfusión y el uso adecuado de la sangre y sus componentes. En el Hospital Municipal “Iluminado Rodríguez” de Jagüey Grande, se realizaron las siguientes acciones: reporte de las reacciones transfusionales, creación del Comité Hospitalario de Hemovigilancia (que permitió tener un control más eficiente del uso de sangre y componentes) y establecimiento de un sistema rápido de alerta que permite tomar decisiones acertadas en un mínimo de tiempo. Se implementó un programa de capacitación continua para profesionales y técnicos que estuvieran directamente relacionados con el Programa de Sangre, con el fin de elevar su nivel científico técnico y se desarrolló una campaña de reclutamiento y retención de donantes. Los resultados de estas acciones demuestran la eficiencia del sistema: incremento de la seguridad transfusional por la disminución de las reacciones transfusionales de 15 en el año 2002 a 6 en el 2005; ausencia de efectos adversos graves, erradicación del consumo de sangre total, disminución del uso de glóbulos y plasma, elevación del nivel de capacitación en el tema en profesionales y técnicos y aporte de sangre segura a la población

Frecuencia fenotípica y génica de los antígenos HLA en una muestra de la población cubana / Phenotypic and genic frequency of HLA antigens in a sample of the Cuban population

Se realizó un estudio de la frecuencia fenotípica y génica de los antígenos del sistema principal de histocompatibilidad HLA en personas no relacionadas, supuestamente sanas, tomadas como muestra de la población cubana. Se analizó la distribución de 87 antígenos HLA clase I ( loci A, B y C) y 25 clase II ( loci DR y DQ). Se emplearon las técnicas de microlinfocitotoxicidad (serológica) descrita por Terasaki y modificada por el NIH para los antígenos de clase I, y las técnicas de biología molecular para los de clase II. Los antígenos clase I del locus A: HLA A2, A9 y A19; del locus B: B5, B12 y B35; y del locus C: Cw4, Cw7; y los antígenos clase II de los locus DR y DQ: DR2, DR3, DR6, DR7, DQ2, DQ5 y DQ6, tienen las frecuencias más altas. Estos resultados son útiles como referencia para los estudios de asociación HLA-enfermedad, en la evaluación de la respuesta a los trasplantes, y a ciertas vacunas por la población cubana

Trasplante de células madre autólogas en el miembro inferior isquémico de un paciente con arteriosclerosis obliterante crítica / Transplant of autologous stem cells in the ischemic lower limb of a patient with severe arteriosclerosis obliterans

Se presenta el caso de un paciente masculino de 72 años, que fue hospitalizado por dolor de reposo intenso en la extremidad inferior derecha y necrosis isquémica del tercer y cuarto dedos del pie con tendencia a extenderse al quinto dedo y al dorso del pie. El estudio angiográfico evidenció una oclusión de la arteria poplítea al nivel de su segmento proximal. El tratamiento habitual no consiguió mejoría y el dolor de reposo se incrementó progresivamente, por lo que existían criterios para una amputación mayor. En estas condiciones se empleó el nuevo método de terapia celular mediante la implantación de células mononucleares de su médula ósea en el miembro inferior isquémico. A las 72 horas de realizado el implante se apreció una marcada mejoría del dolor, del edema, de la temperatura cutánea y de la eritrocianosis, mejoría que incrementó progresivamente y se evitó la amputación de la extremidad isquémica. La evaluación realizada a las 4 y 24 semanas mostró significativa mejoría del estado clínico y de las pruebas funcionales. Este caso sirve de ejemplo de las ventajas que puede ofrecer el tratamiento con células madre adultas autólogas en el manejo de los enfermos con isquemia crónica de los miembros inferiores y su contribución a disminuir la necesidad de amputación de extremidades isquémicas

Aplicacion de la medicina nuclear en el Instituto de Hematología: resultados más relevantes / Most relevant accomplishments from the application of nuclear medicine in the Institute of Hematology and Immunology

La aplicación de la medicina nuclear en el Instituto de Hematología e Inmunología por varios colectivos científicos multidisciplinarios, ha contribuido al desarrollo de estas especialidades en Cuba, lo que ha sido reconocido por la Organización Internacional de la Energía Atómica, gracias a la alta calidad de las técnicas empleadas y los resultados alcanzados que se encuentran al nivel de otros servicios en países desarrollados. Se ha beneficiado a cientos de pacientes, con el diagnóstico y el seguimiento de enfermedades hematológicas, inmunológicas y de otras especialidades, que ha posibilitado una mejoría de la calidad de vida de estos. Se han obtenido resultados originales en policitemias, anemias, síndromes mielodisplásicos y otros trastornos hematológicos, inmunológicos, neuritis, así como en individuos afectados por accidentes nucleares, de impacto, con la aplicación de estas técnicas en biología molecular, en el diagnóstico prenatal de la anemia drepanocítica y la hemofilia, y con la incorporación de técnicas novedosas como la radiosinoviortesis